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动物行为学 | 三箱社会交互行为实验

誉嘉医学 71

前言:

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01简介

三箱社会交互行为实验是一种经典的动物行为学实验,旨在评估小鼠在社会环境中的行为表现。这项实验也被称为“三室社交互动测试”,主要用于探究小鼠对社会刺激的偏好。特别是在自闭症研究中,它被广泛应用于评估小鼠的社交兴趣和社交认知能力。

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02实验原理

实验设计通常包括一个带有三个隔间的箱子,中间隔间是中性区域,两边隔间各放置一个笼子。一边的笼子内放置一只陌生小鼠作为社会刺激,而另一边的笼子要么为空(作为对照),要么放置一种非社会刺激物,例如一个物体。实验动物(即被测试的小鼠)将被放入中间隔间,之后它可以自由地探索所有三个隔间。

研究者会记录实验动物花费在每个隔间以及与社会刺激和非社会刺激的交互时间。通过比较小鼠在有社会刺激和无社会刺激的环境中的行为,研究者可以评估小鼠对社会互动的兴趣和社交认知功能。如果一只小鼠在有陌生小鼠的笼子旁边花费更多时间,这通常被解释为对社会刺激的偏好。

03应用研究领域

三箱社交实验是一种多功能而强大的工具,在各个研究领域都发挥着重要作用:

1. 自闭症谱系障碍(ASD)研究:这项实验对于了解自闭症模型的小鼠行为至关重要。通过观察小鼠在三箱实验中的社交行为,研究人员可以深入研究ASD相关基因或环境因素对社交行为的影响,为治疗自闭症提供新的思路和策略。

2. 社交障碍相关研究:除了自闭症,该实验还可用于研究其他社交障碍,如社交焦虑症或创伤后应激障碍(PTSD),帮助我们了解小鼠在不同社交环境中的行为变化。

3. 神经发育障碍的研究:对于神经发育障碍,如脆性X综合症和雷特综合症,三箱社交实验可以帮助我们理解其社交行为缺陷的机制,并评估潜在的治疗方法。

4. 神经精神药理学:这项实验方法被广泛应用于评估药物对社交行为的影响,尤其是在开发针对社交功能障碍治疗的药物时,为药物研发提供重要数据支持。

5. 基因表达与行为的关联研究:通过对基因敲除或敲入小鼠进行三箱社交实验,研究人员可以探索特定基因如何影响社交行为的机制。

6. 社会记忆的研究:通过在隔间中置换陌生小鼠,研究者可以评估实验小鼠对于旧的和新的社会刺激的记忆和区分能力,从而了解其社会记忆的表现。

7. 环境和行为的相互作用研究:该实验可用于研究环境因素如何通过影响小鼠的社交行为来影响其发展和行为表现,进一步揭示环境与行为之间的相互作用。

8. 早期干预效果的评估:对于在小鼠早期进行的各种干预,比如药物处理或特定经验的暴露,三箱社交实验可以用来评估这些干预措施是否对小鼠成年后的社交行为产生了长期影响,从而为早期干预提供科学依据。

04实验准备

小鼠、实验装置、拍摄装置。

具体实验设置:

1. 实验装置由三个矩形箱子组成,每个箱子内径规格为 40.undefined2undefined22 cm,而且每个箱子之间的分隔板为透明的树脂玻璃,中间有通道使三箱相通。

2. 在左侧和右侧箱子的中央各放置一个规格一致的金属笼子,其大小足够容纳一只小鼠。

3. 行为测试最好安排在白天的 9:00~18:00 之间,以确保照明均匀且强度在 650 lux 左右。

4. 通过录像机记录整个实验过程,以便后期数据分析。

5. 在每轮实验之后,使用 75% 的酒精和卫生纸擦拭实验装置,以确保清洁卫生。

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实验步骤

本次实验用 CRS 软件拍摄,以 Src3+/- 小鼠举例,主要分两阶段:

1第一阶段(社交能力)

在三箱中,一侧放置一只陌生的同种小鼠(Stranger 1),另一侧则只有一个空的金属笼子,让测试小鼠在三箱中自由活动。

1. 实验开始前,将小鼠放置在行为测试室中适应半个小时。

2. 不使用透明的玻璃树脂板隔开三个箱子,而是让测试小鼠直接放入中间的箱子中适应 5 分钟。

3. 随机将 Stranger 1 同性小鼠放入左侧箱子中的金属笼子中,右侧箱子的金属笼子保持空着。

4. 去除隔板,使测试小鼠可以在三个箱子中自由活动 5 分钟。

5. 立即开始录像并记录以下相关参数:

- 参数1:测试小鼠与 Stranger 1 或空的金属笼之间的直接接触次数和持续时间,金属笼周围 3~5 cm 范围内被定义为接触范围。

- 参数2:测试小鼠进入每个箱子的次数和持续时间,只有当小鼠的头部和四肢都进入一个箱子时,才被视为它处于该箱子中。

2第二阶段(社交新奇性)

在另一侧放置另一只陌生的同种小鼠(Stranger 2),测试小鼠同样在三箱中自由活动。在第一阶段实验进行了 1 小时后,将空着的金属笼子中放入第二只陌生同种同性小鼠(Stranger 2),然后记录 5 分钟,观察测试小鼠与 Stranger 1 和 Stranger 2 之间相互接触的时间和次数。

3第三阶段(社交记忆

在第一、二阶段完成 24 小时后,将 Stranger 2 小鼠换成另一只新的陌生小鼠(Stranger 3),然后记录 5 分钟,观察测试小鼠与 Stranger 1 和 Stranger 3 的接触次数和时间。若测试小鼠对 Stranger 3 没有社交好奇心,即对两侧小鼠的接触次数和时间差异不显著,则说明其社交记忆能力较弱。统计分析方法与第二阶段类似。

06数据分析

接下来,我们将对野生型小鼠(WT)和基因敲除小鼠之间的行为差异进行数据分析。正常小鼠通常会展现出社交行为,在第一阶段的实验中,我们观察到正常小鼠与 Stranger 1 的交流时间和次数明显多于空的金属笼。此外,小鼠还具有记忆和偏好新事物的特性,因此在第二阶段中,小鼠更倾向于与之前未见面的 Stranger 2 进行交流,而不是已经熟悉的 Stranger 1,这一点可以从下图中看出。

在第三阶段,由于 Stranger 1 已经被测试小鼠熟悉了两次,因此我们将野生型小鼠对 Stranger 3 的社交好奇心和偏好性与 SRC3 杂合子小鼠进行比较。如果野生型小鼠对 Stranger 3 表现出社交好奇心和偏好性,而 SRC3 杂合子小鼠对两只小鼠的接触次数和时间差不多,则表明 SRC3 杂合子小鼠的社交记忆能力较低。

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07注意事项

1. 确保所有实验小鼠的健康状况良好,并且处于相似的环境条件下,以保证实验结果的可靠性。

2. 陌生小鼠的更换频率和来源应保持一致,以避免非实验变量对实验结果的影响。

3. 确保记录数据的研究员对实验分组保持不知情状态,以减少观察者偏见的可能性,确保数据的客观性和可信度。

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