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神经领域中「特异性启动子AAV」的妙用

脑科学世界 311

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本文来源病毒实验帮。已授权转载

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特异性启动子效果展示:

1. GFAP 星形胶质细胞特异性启动子

NDRG2在促进从间质空间中摄取星形胶质谷氨酸和保护大脑免受谷氨酸兴奋性毒性方面起关键作用。

NDRG2 Protects the Brain from Excitotoxicity by Facilitating Interstitial Glutamate Uptake. Translational Stroke Research (IF= 5.78). 空军军医大学西京医院

注射参数

病毒类型: AAV-GFAP-NDRG2

注射部位:小鼠侧脑室

注射方法: 3 μL,1×1012 vector genomes/mL。注射速率1 μL/min,注射后停留5min

检测时间:3周

AAV-GFAP-NDRG2注射Ndrg2-/-小鼠侧脑室后,在星形胶质细胞中的表达

APP / PS1小鼠星形胶质细胞中铁调素的过表达可部分缓解AD症状并延缓AD的病理过程。

Astrocyte hepcidin ameliorates neuronal loss through attenuating brain iron deposition and oxidative stress in APP/PS1 mice. Free Radical Biology and Medicine (IF= 6.17). 河北师范大学

注射参数

病毒类型: AAV9-GFAP-Hamp

注射部位:小鼠侧脑室

注射方法: 5 μL, 病毒滴度108 v.p./μL。速率1 μL/min,注射后停留5min。6周后再次注射

检测时间:5个月

Hepcidin和星形胶质细胞在小鼠皮质切片中的共定位

2. CD68 小胶质细胞特异性启动子

海马TREM2在改善HFD引起的认知功能障碍和促进小胶质细胞向M2抗炎表型分化方面起着重要作用。TREM2可能是干预肥胖/糖尿病相关认知功能下降的新靶标。

Hippocampal overexpression of TREM2 ameliorates high fat diet induced cognitive impairment and modulates phenotypic polarization of the microglia. Genes & Diseases (IF=4.803). 重庆医科大学第一附属医院

注射参数

病毒类型: AAV-CD68-TREM2

注射部位:小鼠海马

注射方法: 双侧注射,1 μl/位点,滴度1.63×1012 vector genomes/ml。速率 0.2 μl/min,注射后停留5min

检测时间:12 周

TREM2在海马中的蛋白表达水平及和iba-1 共定位鉴定

3. CaMKIIa 前脑谷氨酸能神经元特异性启动子

南京医科大学罗春霞教授在mPFC中nNOS+ 神经元转导疼痛信号为焦虑行为研究取得重要进展,研究发现来自pPVT脑区的疼痛信号激活mPFC中nNOS+神经元,从而介导焦虑行为。在本研究中,研究者首先发现慢性疼痛激活pPVT脑区兴奋性神经元,pPVT脑区神经元投射到mPFC,激活mPFC中nNOS+神经元,诱发焦虑行为的产生。

研究发现nNOS+神经元被激活后,促使NO生成增加,异常增加的NO通过亚硝基化作用使AMPAR上膜,最终使mPFC脑区中CaMIIα+神经元突触传递增强从而介导焦虑行为。点击查看详情!

nNOS-expressing neurons in the vmPFC transform pPVT-derived chronic pain signals into anxiety behaviors. Nature communications(IF=12.121). 南京医科大学

注射参数

病毒类型: AAV-hSyn-HA-hM4Di-IRES-mCitrineAAV-CaMKIIα-eGFPAAV-hsyn-DIO-hM3Dq-eGFPAAV-hsyn-DIO-hM4Di-eGFPAAV-hsyn-DIO-mCherryAAV-CaMKIIα-ChR2-eYFPAAV-CMV-flex-shVGAT-eGFPAAV-CMV-flex-shVGLUT-eGFP

注射部位:小鼠前额叶皮质

注射方法: 0.2—0.4 μL

检测时间:3 周

AAV-CaMKIIα-ChR2-eYFP 注射前额叶皮层vmPFC

东北师范大学生命科学学院朱筱娟教授课题组在抑郁症精神疾病发病机制研究上取得重要进展,研究发现HuR作为一个RNA结合蛋白在前额叶皮质区,参与并调节了压力介导的小鼠的抑郁行为。

HuR通过调节RhoA的表达,进而调节了压力导致的神经突触的结构和功能的可塑性。这一研究为探寻抑郁症的发生机制提供了理论研究基础,为相关疾病的治疗提供了新的药物靶点。点击查看详情!

HuR in the Medial Prefrontal Cortex is Critical for Stress-Induced Synaptic Dysfunction and Depressive-Like Symptoms in Mice. Cerebral Cortex (IF=5.043). 东北师范大学

注射参数

病毒类型: AAV-CaMKIIa-mCherry-2 A-Cre

注射部位:小鼠前额叶皮质

注射方法: 1 μL,注射速率0.2 μL/min。注射后停留2min。

检测时间:3周

AAV-CaMKIIa-mCherry-2 A-Cre注射HuRloxp/loxp小鼠的前额叶皮质区

4. hSyn 神经元特异性启动子

南京医科大学朱东亚教授团队发现介导恐惧记忆泛化新机制。文章聚焦背景关联型恐惧记忆泛化的神经环路机制,从背景关联型恐惧记忆激活的脑区出发,研究前扣带回和腹侧海马之间的投射关系,并证明了前扣带回至腹侧海马神经投射的过度激活导致了背景关联型恐惧记忆的泛化,且通过光遗传学或化学遗传学技术手段特异性抑制该神经环路能够显著减少恐惧记忆的泛化。点击查看详情!

Anterior cingulate cortex to ventral hippocampus circuit mediates contextual fear generalization. Journal of Neuroscience (IF= 5.673). 南京医科大学

注射参数

病毒类型: 化学遗传抑制剂AAV9-hSyn-HA-hM4Di-IRES-mCitrine;光遗传AAV9-CaMKIIα-ChR2-EYFP

注射部位:小鼠前扣带皮层ACC、腹侧海马vHPC、背侧海马dHPC等

注射方法: 双侧注射,ACC 0.4 μL/位点,dHPC 和 vHPC 0.6 μL/位点。注射速率 0.15 μL/min

检测时间:4 周

AAV9-hSyn-HA-hM4Di-IRES-mCitrine注射小鼠背侧海马dHPC

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