以下文章来源于梅斯肿瘤新前沿 ，作者Potato

导语

近年来，免疫治疗PD-L1抑制剂在治疗恶性肿瘤方面引起了广泛的关注。与常规化疗和靶向治疗相比，PD-L1抑制剂被认为是一种突破性的创新疗法。其抑制剂通过阻断PD-1/PD-L1信号通路来增强T细胞的活性，从而发挥广谱的抗癌作用，使患者的生存期显著延长。当前已经批准了多种PD-L1抑制剂，研究证实患者PD-L1蛋白的水平越高，使用免疫治疗获得的效果就越好。因此，检测患者的PD-L1表达水平成为指导临床治疗方案选择的重要指标。然而，问题在于如何准确地检测PD-L1表达水平？

1免疫组化检测

PD-L1的检测方法主要采用免疫组化技术，该技术能够检测肿瘤组织中PD-L1蛋白的表达水平。在临床试验中，可以通过取得的肿瘤组织样本进行切片染色，并使用特定的抗体对PD-L1进行着色。病理医师会根据镜下观察着色的深浅来评估PD-L1的表达情况。在这个过程中，抗体的特异性和病理医生的评价标准是影响检测结果的主要因素。目前获FDA批准的抗体主要有三种，Dako22C3、Dako28-8 、VentanaSP14。

2表达评价指标

临床中定义了几种PD-L1表达的统计标准，包括： 1. TPS ：肿瘤细胞阳性表达率。计算方法是将PD-L1阳性的肿瘤细胞数除以总肿瘤细胞数并乘以100。 2. CPS ：细胞阳性表达率。计算方法是将PD-L1阳性的肿瘤细胞数加上PD-L1阳性的免疫细胞数，再除以总肿瘤细胞数并乘以100。 3. IPS ：免疫组织阳性评分。评估PD-L1在免疫细胞中的表达情况，由病理医师根据观察情况进行评分，常用的评分系统包括0到3+。 4. TC：肿瘤细胞阳性数量。根据统计PD-L1阳性的肿瘤细胞数量来评估PD-L1的表达水平。 5. IC ：免疫细胞阳性数量。根据统计PD-L1阳性的免疫细胞数量来评估PD-L1的表达水平。 这些标准用于评估PD-L1的表达情况，具体的计算方法可以根据标准来统计PD-L1阳性细胞的数量，并与总细胞数进行比例计算。根据具体的标准和计算方法，可以更准确地评估PD-L1的表达水平。

TPS

在同一版的CSCO肺癌指南推荐列表中，帕博利珠单抗选择使用TPS（Tumor Proportion Score），而阿替利珠单抗选择使用TC（Tumor Cell），这主要是因为历史原因。默沙东作为帕博利珠单抗的生产商，最先开始使用TPS来对人群进行分层临床研究，并取得了显著的统计学效果。安捷伦公司为帕博利珠单抗量身定制的PD-L1伴随诊断试剂PD-L1 IHC 22C3 pharmDx率先获批，从而推广认可了TPS的使用。 然而，后来进入PD-L1检测领域的其他试剂和平台，为了避免知识产权纠纷，选择了TC作为指标名称。例如FDA批准的VENTANA PD-L1(SP142) assay用于阿替利珠单抗的伴随/补充诊断，其获批阈值为TC ≥ 50% 或 IC ≥ 10%。 需要注意的是，TPS和TC代表相同的含义，但不同平台的检测敏感度不同，不同药物之间的检测结果也不能通用。例如，研究表明PD-L1（22C3）在DAKO和ROCHE免疫组化染色平台的染色效果最佳，而在Leica和手工平台上的染色效果较差。严格意义上，这两个指标不能混用，评估时需要严格按照药监部门推荐的平台阈值进行评价。

CPS

除了肿瘤细胞，免疫细胞和间质细胞也会表达PD-L1，从而抑制免疫功能。研究发现评估免疫细胞的PD-L1表达水平与免疫治疗药物的响应度密切相关。因此，联合阳性分数（CPS）比肿瘤比例分数（TPS）更准确评估PD-L1。目前，大部分肿瘤诊疗指南推荐使用CPS，尤其是对于头颈鳞状细胞癌、食管癌、胃癌和乳腺癌等癌症。CPS评价界值与TPS的1%、50%不同，具体取决于不同的癌症类型。目前已经被FDA/EMA批准用于免疫检查点抑制剂的用药指导的CPS评价包括以下情况：CPS≥1适用于复发性局部晚期/转移性胃癌/胃食管结合部腺癌的二线以上治疗，以及复发/转移性宫颈癌的治疗。CPS≥10适用于局部晚期/转移性尿路上皮癌的治疗。随着不同癌种治疗研究的不断扩展，选择的CPScutoff值也在增加，例如头颈鳞状细胞癌选取CPS≥20作为检测评判的界值。

IPS

除了考虑PD-L1表达水平，单独评估免疫细胞的PD-L1表达情况也引入了免疫评分指数（IPS），用于区分免疫治疗中的受益人群。例如，罗氏公司的Tentriq™（Atezolizumab）在尿路上皮癌和肺癌（Poplar研究）以及阿斯利康公司的Imfinzi™（Durvalumab）在尿路上皮癌（Atlantic研究）的临床研究中均使用了IPS作为评估指标。这进一步丰富了免疫治疗的评估体系。

3PD-L1抑制剂评分举例

总结

目前，PD-L1的检测主要是通过蛋白水平的检测。然而，最近在2020年AACR大会上报道了一项临床研究，该研究通过基因检测评估PD-L1的表达。研究者使用了一种称为nCounter的基因表达技术，通过数字技术来量化PDL1基因的表达水平，以证明直接检测mRNA水平也可以准确评估PD-L1的表达水平。在这项研究中，研究者设计了一个包含7种与免疫相关的基因的检测Panel，其中包括CD4、CD8、PD-1、PD-L1、IFNy、GZMM和FOXP3。通过检测这些基因，研究者不仅可以评估常规靶向基因突变，还可以评估PDL1基因的表达。结果显示，当以免疫组化PD-L1表达1%为分界点时，PD-L1 mRNA的表达水平与PD-L1免疫组化的表达水平具有76%的一致性，Kappa值为0755。这表明PD-L1 mRNA的基因表达可以很好地预测非小细胞肺癌患者中PD-L1蛋白的表达。这项研究结果表明，PD-L1 mRNA的基因表达在预测PD-L1蛋白表达方面具有良好的应用前景。目前，研究者正在进一步研究nCounter检测Panel是否可以在临床实际应用中替代免疫组化来预测药物疗效，我们期待进一步的验证结果。同时，我们也期待国内的基因检测公司能够开发出自己的PDL1表达水平的检测试剂盒。

参考资料1.Analysis of PDL1 (22C3) Staining Results on Different Platforms. China Medical Device Information. 2021-08-15.2. Chinese Society of Clinical Oncology (CSCO) Guideline Working Committee. Clinical Application Guidelines of Immune Checkpoint Inhibitors by Chinese Society of Clinical Oncology (CSCO) 2021. Beijing: People's Medical Publishing House.