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超级干货分享——体外胚胎在牧场的应用

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前言:

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北京八零同创技术有限公司总经理吉广强

活体采卵结合体外胚胎生产技术,作为当前奶牛快速扩繁的关键技术手段之一,能够显著提高牛的繁殖效率,对推动奶牛良种扩繁具有至关重要的价值。这一技术以效率、运用灵活供体影响较小的特点,为我国奶牛产业的发展带来了广阔的前景。然而,尽管该技术体系具有诸多优势,但目前我国在这方面的研究与应用尚处于起步阶段,仍有许多需要提升和改进的地方。

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USA-育种现状

国外以美国为主的体外胚胎移植技术的应用相较于我国早了将近30年,经过长期的实践和研究,该技术已经发展得相对成熟和广泛。早在1944年美国荷斯坦协会的存栏量数据显示就高达2569万头,单产约为2吨。然而,尽管存栏量较高,但产量相对较低经过70余年的育种技术发展,美国的存栏量已经降至930万头,减少了1639万头,数量下降幅度很大。但是产量提升速度很快,从原来的约2吨提升至11.6吨,根据最新数据,已达到12.5以上。这充分说明了育种技术的持续发展和不断进步提高畜牧业生产效益的重要作用。

基于我国现状诸多牧场已将减少奶牛的养殖数量,同时提高总产量定为目标。然而,若仅依赖传统的人工授精技术来改善牛群,遗传进展相对缓慢。因此,为了加快遗传进展,优化牛群结构,提高产量,我们亟需一种快捷、直接的胚胎移植技术。

在牧场经营过程中,我们必须采取有效的措施,真正降低投入,提高产量,同时解决污水排放和碳排放等问题,以保障牛群的健康和长寿。只有这样,我们才能实现真正的盈利。美国通过应用胚胎移植技术,成功地减少了牛群数量79%,从而减少了养殖用地90%,养殖用水50%,粪污排放76%,碳排放41%,同时增加了牛奶产量64%。这些数据表明,通过科学生物技术的应用可以实现牧场经营的高效和可持续发展。

根据美国胚胎移植协会2022年发布的数据显示,国外目前的体外胚胎使用率接近40%,性控冻精使用率则在50~55%,而体内胚胎使用率约为5%左右。可以看出,牛群的优化和育种离不开体外胚胎移植这一基础技术手段。以美国胚胎移植协会数据统计2016年其体内胚胎和体外胚胎的移植数量基本持平,而自2016年以后,体外胚胎生产数量开始直线上升。到2021年时,其体外胚胎年生产数量已经达到了22万枚。由此可见,国外的育种工作多年来一直应用胚胎移植这一重要技术在亚洲国家,胚胎移植技术的运用相对较少。在牛群的营养、管理和牧场经营模式等方面,与国际先进水平仍存在一定差距。这些因素成为了制约国内牛群优化速度的重要原因之一。我们应加强对胚胎移植技术的研究与应用,提高牛群的整体质量,推动国内畜牧业的发展。

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活体采卵-体外受精(OPU-IVF)

首先,需要建立核心牛群,通过基因组检测技术,从牛群中筛选出遗传价值较高的犊牛,并将其划定为一个特定的群体。传统的筛选方法通常是从系谱或公牛冻精进行筛选,而应用基因组检测后,同一牛群推算出的结果存在较大差距。因此,我们需要筛选出最好的10%的牛作为核心牛群,以供活体取卵和体外胚胎生产。在除去这10%的核心牛群后,再选择50%的牛群利用传统方法进行扩群,以实现群体的扩充。另外40%的牛群则作为受体,这些受体牛不仅仅用于代孕荷斯坦胚胎,也会代孕一些肉牛胚胎,例如和牛。目前,和牛市场也备受关注。通过这些方法,犊牛出生后,其后续增值和附加值将得到大幅提升。

在开始选择供体牛时,八零同创严格筛选出TPI指数超过2500的优质供体母牛。通过使用我们精选的优秀种公牛冻精,其后代TPI指数高达2871,显著提升了种群的整体水平,使得我国种群与国外核心种群相媲美。供体公牛

供体母牛

后代预计育种值

TPI:3243

TPI:2500

TPI:2871

NM$:1258

NM$:500

NM$:879

牛活体采卵( OPU)-体外胚胎生产( IVP)技术发展日渐成熟和完善。如今,OPU技术结合IVP技术已经成为优质奶牛快速扩繁的最主要技术手段,良种奶牛的繁殖效率得到极大提高,其为牧场带来的效益不容忽视。未来的发展方向和定位应该是充分利用胚胎组合的优势,以两年的时间实现群体数量的快速增长。在胚胎生产和应用中,种子母牛和公牛的选择以及胚胎组合的重要性是不容忽视的重要环节。所有的数据都来源于基因检测的数据,这样才能精准选择适合牛群育种方向的种牛和种子母牛。

体外胚胎生产流程第一项:OPU活体采卵

OPU技术借助活体采卵仪、探头导针枪和负压泵,在牛的卵巢上将卵泡中的卵母细胞抽取出来,这是一个负压的过程。供体牛的选择范围相对较广,通常8个月龄的育成牛开始采卵,一直持续到怀孕90天的母牛,只要卵巢没有过度下沉,都可以进行活体取卵技术

八零同创目前没有对怀孕牛进行活体取卵,因为体外胚胎生产领域还处于起步阶段,牧场管理者对该技术仍存在许多质疑和疑问,如果利用怀孕牛进行采卵心会对牛造成一定的流产损失等影响,引起不必要的担忧,因此,八零同创选择8至14个月的牛进行采卵,并在采集完成后尽快将其转入生产群进行配种。通过这种方式,不仅可以获得优质的卵母细胞,生产更多的胚胎,同时也不会影响种子母牛继续繁育下一代,体现其生产价值。

体外胚胎生产流程第二项捡卵

在提取卵母细胞后,立即将其送至捡卵室。捡卵室的环境需满足捡卵要求的标准,其清洁干净的卫生和温度控制尤为关键,温度必须控制在25度这一重要指标

在体外卵母细胞培养之前,需对进行清洗、分级、培养,并从中择取一级与二级两个级别卵母细胞。此选择主要依据卵颗粒层数以及内细胞团的均匀程度来进行。若卵母细胞质量优良,则最终得到的胚胎数量将更多,进而受胎率也将高。

体外胚胎生产流程第三项IVM体外成熟

在完成卵母细胞的清洗分级培养后,接下来是体外卵母细胞的成熟阶段。这一过程涉及到诸多前期工作和环节。

关于体外成熟的模式,存在两种选择。第一种是有气成熟,当牧场与实验室距离较近时,可在牧场直接采集卵母细胞并进行培养。另一种是无气成熟,即可以进行远距离运输。值得注意的是,在运输过程中,卵母细胞未受到外界的影响,它们依然处于成熟发育的过程。因此,运输时间有着严格的要求,必须在24个小时以内将卵母细胞送达实验室。为了确保卵母细胞的受精不受延误,从取卵的那一刻开始计算到达实验室的时间,务必要控制在24小时以内,以确保第二天能够准时进行受精。

体外胚胎生产流程第四项IVF体外授精

在卵母细胞成熟后,需进行人工授精,随后在受精的8至12小时内,让整个受精过程在培养箱内完成。因此,为了确保精操作的顺利进行,必须根据活体采卵时间,合理安排精操作时间。

体外胚胎生产流程第五项IVC体外培养

受精卵在体外培养过程中,经历了从卵母细胞提取出来,再到受精、卵裂等阶段。卵裂是一个连续的分裂过程,从2细胞开始,逐分裂为4细胞、8细胞,直至形成桑椹胚,桑椹胚进一步发育为囊胚,最终孵化着床,发育成新的个体。

体外胚胎生产流程第六项胚胎评级

在胚胎培养到第七天,对囊胚进行质量评级是一个至关重要的环节。只有优质的胚胎,才可能实现良好的获犊率,这是检验生产胚胎的质量、技术能力以及各环节控制的重要过程。

关于胚胎的评级,八零同创目前采取的是对胚胎两个标准进行评级第一个标准是观察胚胎的发育时间,判断其发育时间与发育阶段是否一致。如果在发育时间内,胚胎未能达到该发育阶段,那么可以判定为发育迟缓,不会被采用,这是评级的一标准。第二个标准是评估胚胎的形态完整性,需要观察胚胎内部细胞退化以及凋亡的细胞所占比例。级胚胎的标准是具有完整的透明带、清晰的滋养层和紧密的细胞团。如果内细胞团中死细胞比例超过25%,则被评为B级胚胎,不会被采用。只有从这两个标准同时对胚胎进行综合评判,并确保胚胎都是一级胚胎,才能确保胚胎具有50%以上的高受孕率。

体外胚胎生产流程第七项胚胎冷冻

另外,如受体牛的准备工作不足,或牧场距离较远,或运输时间不合适,则需要进行胚胎冷冻。目前胚胎冷冻有两种方法。第一种方法是玻璃化冷冻,该方法在应用上已较为广泛,其冷冻效果好且稳定,但操作相对费时且繁琐,需要解冻人员进行多步骤解冻操作。另一种方法是程序化冷冻,这是八零同创今年的一项技术突破。目前国外体外胚胎仍普遍采用玻璃化冷冻方式,八零同创优化了化冷冻方法,使牧场能够更方便、更简单地操作,类似于解冻冻精,从而实现现场解冻移植操作。

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活体采卵-体外受精(OPU-IVF)

体外胚胎生产流程第八项鲜胚移植

胚胎移植指的是将实验室培育的胚胎通过特定运输箱运送至各牧场,进行移植操作。在生产过程中,八零同创会要求牧场提前报备每日所需的胚胎数量以及当前可用的受体牛只数量,当天生产的合格胚胎,我们会立即将其装入特制的运输箱中,并通过通勤车方便快捷地送至各个牧场。这样,我们能够有效地进行胚移植工作,并确保整个流程的顺利进行。

体外胚胎生产流程第九项受胎率情况讨论

受胎率不稳定的原因可能受到多种因素的影响,包括技术人员的水平、受体牛的健康状况以及胚胎质量等。这些环节都可能对受胎率产生影响,因此不能简单地归结为某个环节的问题。

胚胎移植的重点

首先,技术人员的技能水平对受胎率有着至关重要的影响。一名优秀的技术人员需要具备丰富的实践经验,能够准确判断受体的卵巢状况和周期性黄体,以提供最优质的移植服务。

其次,受体的健康状况对受胎率也有着不可忽视的作用。为了确保移植的成功率和后代的健康,受体牛的营养平衡、身体健康以及应急管理等都是至关重要的。尤其要关注后备牛的营养管理,确保其健康成长,胚胎移植时合理安排防疫流程。

最后,胚胎质量也是影响受胎率的关键因素。优质胚胎能够显著提高获得健康犊牛的数量。因此,胚胎质量的优劣对受胎率和获犊率有着直接的影响。

在牧场实践中,只有同时具备优秀的技术人员、健康的受体牛以及质的胚胎,才能实现受胎率的有效提升。这需要我们在各环节进行充分的配合,才能将胚胎移植工作做到最佳效果。

在八零同创的标准中,胚胎移植受胎率不得低于40%,这个数字是最低要求,无论从牧场的角度,还是从优化牛群结构的角度来看,如果能达到60%甚至更高,那就更好了。在这个过程中,我们需要牧场先进行评估,以便了解是否能够达到最高受胎率。最终的目标是实现较高的获犊率,同时受胎率越高,付出的成本就越低,最终得到的优质牛群也就越多。

总体来说,牧场使用胚胎的目标是获得一头活的有价值的犊牛,卵母细胞的质量是决定体外胚胎成功的关键因素,实验室的质量控制是减少胚胎在生产过程中的不确定性,高质量的胚胎在正常的时间发育到相对应的阶段,由经验丰富的技术人员在发情后第7天移植到管理良好的受体牛体内,以得到更高的受孕率,同时做好记录和保存,用于分析和改进,只有执行好每一个细节才是成功的关键!

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使用OPU-IVF的价值

GS基因组检测技术+IVP胚胎生产技术=效益最大化在考虑奶牛的利用年限时,我们认识到,奶牛真正发挥价值的阶段是在其生产2胎到5胎的时期。因此,无论是从种用的角度,还是从产奶量的角度,只有保持奶牛的健康和长寿,才能充分展现其潜力并产生最大的价值。整体而言,这样做无疑会对产业产生积极的推动作用。

另外,胚胎移植技术的运用,可以实现小胚胎带动大产业的效果。通过胚胎生产的方式,我们可以进行保种、扩繁,缩短世代间隔,进而推动整个产业的振兴。

当然,要实现牛群的优化,我们需要培育出优质的种牛。最终,根据种牛的寿命和各项指标,我们可以评估其价值并面向市场。这不仅关乎产量,因为养殖业的周期性、成本投入和经济价值都占据重要地位。

吉广强北京八零同创技术有限公司总经理,毕业于山东青岛农业大学,具有20年胚胎移植经验,体内体外胚胎移植数量近5万枚,具有丰富的理论知识和实践经验。

北京八零同创技术有限公司是一家熟练利用超数排卵、胚胎生产和胚胎移植等先进繁育技术的公司,既具有现代繁育技术研发与应用背景,又具有使用冻精为客户量身定做选配育种方案的实践经验。公司拥有强大繁育技术背景。公司为美国荷斯坦品种协会中国区域注册登记协调单位。八零同创公司拥有一支强大的专业技术服务团队,可提供体内、体外胚胎生产、胚胎移植技术服务,同时也是国际胚胎移植协会(IETS)的会员单位,拥有生产冷冻胚胎细管溯源统一编码“2162”,现已在国内与多家集团牧场建立体外胚胎生产合作关系根据“农垦乳业联盟对标行动第十期-走进宁夏农垦乳业股份有限公司”的专家报告进行整理,已经专家审核。编辑整理:王煜东近期好文推荐

图文编辑:王煜东、肖鑫鑫 责任编辑:王晶

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